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使用Drop-off和Naica三色多重检测系统,设计了三种包含内部质控对照(IC,Internal Control)的Drop-off数字PCR检测方法,用于检测最常见的KRAS 3号外显子、NRAS 2号外显子和EGFR 19号外显子的基因突变情况(如图2,3)。
与drop-off突变体相对的LOD值随着预期的野生型浓度呈指数增加的趋势(在95%置信水平下,LOD从0.2增加到0.27cp/ul) 如果不排除双阳的点而将其归为阴性微滴中,则MAF的Drop-off突变则会低估25%。